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        大蒜，百合科多年生草本植物大蒜Auium Sa tivumL.的鱗莖。《名醫(yī)別錄》中指出，大蒜具有“散痛腫匿瘡”，“除風邪，殺毒氣” 等功用;《新修本草》中說大蒜可“下氣、消谷、化肉”;《本草綱目》稱大蒜有“化腐朽為神奇”的作用，“能辟邪惡，消癰腫”?，F(xiàn)代醫(yī)學研究結(jié)果表明，大蒜中含有的氨基酸、維生素、大蒜素、黃酮類化合物等，對多種致病菌都有抑制或殺滅作用，可用于恢復疲勞、預防高血壓病、預防動脈硬化、預防寒瘧、預防感冒、預防高血脂癥，其中所含的微量元素硒和硫，能夠增強人體的免疫功能。同時可治療癰癤腫脹、鉤蟲、燒蟲病、頓咳、痢疾、泄瀉等。因大蒜含黃酮類等，有多種藥用價值。

　　近年來，超聲技術(shù)應用于提取植物中的生物堿、苷類、生物活性物質(zhì)、動物組織漿的毒質(zhì)等研究已有報道，表明其具有能耗低、效率高、不破壞有效成分的特點。很多研究表明，利用超聲波產(chǎn)生的強烈振動、高的加速度、強烈的空化效應、攪拌作用等，可加速植物材料中的有效成分進入溶劑，從而增加有效成分的提取率，縮短提取時間，并且還可避免高溫對提取成分的影響。超聲技術(shù)應用于提取大蒜中黃酮類物質(zhì)的研究尚未見報道，本文報道用超聲波提取大蒜總黃酮及鑒別。

　　1　儀器與試劑

　　1.1　儀器　JP600G型超聲波提取罐(武漢嘉鵬電子有限公司);UV-755B紫外可見分光光度計(上海分析儀器總廠);ZF-Ⅰ型三用紫外分析儀(上海顧村光電儀器廠);SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)。

　　1.2　試劑　95%乙醇AR;亞硝酸鈉AR;硝酸鋁AR;正丁醇AR 氧化鈉AR;三氯化鋁AR;鹽酸AR;氨水AR;鎂粉AR;乙酸鎂粉 AR;冰醋酸AR;醋酸乙酯AR;蘆丁標準品(中國藥品生物制品檢定所);廣西百色市人民菜市市售大蒜。

　　2　方法與結(jié)果

　　2.1　總黃酮成分提取　取大蒜瓣，烘干，粉碎。稱取大蒜粉末約 6g，加80 ml 95%乙醇，超聲波提取2.5 h，抽濾。濾渣再加80 ml 95%乙醇，超聲波提取2.5 h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩25 ml左右為止，放置250 ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。

　　2.2　測定方法依據(jù)　以蘆丁為對照品測定大蒜中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡合物，在可見光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰。

　　2.3　定量實驗-總黃酮的含量測定

　　2.3.1　波長的選擇　取樣品液適量，在0.30 ml 5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經(jīng)硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在 420～700 nm波長范圍測定絡合物的吸光度，絡合物于510 nm 波長處有好的吸收，故測定時選用此波長。

　　2.3.2　標準曲線的繪制　分別精密吸取蘆丁對照液(0.10 mg/ ml)0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 ml于10.00 ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30 ml，搖勻，靜置6 min;再加 10%硝酸鋁溶液0.30 ml，搖勻，靜置6 min;再加4%氫氧化鈉溶液4.00 ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12 min，以試劑作空白參比液，于510 nm處測定吸光度。結(jié)果見表1。

　　根據(jù)上表得回歸方程,A=-0.031 1+13.518 4C,r=0.999 9。

　　2.3.3　提取物含量的測定　精密吸取樣品液5.00 ml，置10.00 ml容量瓶，按標準曲線的制備方法測定其吸光度A=0.228，根據(jù)回歸方程：A=-031 1+13.518 4C，計算樣品中總黃酮的含量C =3.833%，提取率遠遠高于醇提法。

　　2.3.4　回收率實驗　精密量取樣品液2.00 ml，加入標準蘆丁對照品2.00 ml(0.10 mg/ml)，同前樣品測定方法操作測定吸光度，求出回收率為101.9%。

　　2.4　定性實驗-總黃酮的鑒別

　　2.4.1 顏色反應

　　紫外光下呈色反應：取該樣品溶液點在濾紙上，在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點。

　　濃氨水反應：取該樣品溶液點在濾紙上，將濾紙在氨水上方熏30 s，立即在紫外光下觀察，呈很明顯的黃褐色熒光斑點。

　　三氯化鋁反應：取樣品溶液點在濾紙上，滴加1%三氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈黃色熒光斑點。

　　乙酸鎂反應：取樣品溶液點在濾紙上，滴加1%乙酸鎂甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黃色斑點。

　　鹽酸-鎂粉反應：取乙醇提取液1 ml于試管中加鎂粉，再加入濃鹽酸數(shù)滴(1次加入)，在泡沫處呈紫紅色。

　　表1　紫外可見分光光度計測定蘆丁對照液吸光度

　　———————————————

　　C/mg·ml-1 吸光度

　　———————————————

　　0.00 0.00

　　0.005 0.041

　　0.01 0.102

　　0.02 0.238

　　0.03 0.371

　　0.04 0.509

　　0.05 0.648

　　———————————————

　　2.4.2　紙層析　取樣品溶液10μl點在濾紙上。用正丁醇：醋酸：水=4:1:5(體積比)為展開劑，上行展開5 h,取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可見熒光斑點。

　　3　討論

　　實驗結(jié)果表明，本實驗方法工藝簡單，回收率為101.9%，利用本文所提供的超聲波提取、純化方法而得到的黃酮類物質(zhì)其純度較高。超聲波可以強化乙醇浸提法，達到省時、節(jié)能的目的，此方法采用全物理過程，無任何污染，是一條理想的提取黃酮類物質(zhì)的途徑，具有廣闊的應用前景。

　　黃酮類化合物是一大類天然產(chǎn)物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分。在自然界中常見的是黃酮和黃酮醇，其它包括雙氫黃(醇)、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等。天然來源的生物黃酮分子量小，能被人體迅速吸收，能通過血腦屏障，能進入脂肪組織，進而體現(xiàn)出如下功能：消除疲勞、保護血管、防動脈硬化、擴張毛細血管、疏通微循環(huán)、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大腦及其他臟器細胞的功能。

　　黃酮類化合物具有抗癌、抗腫瘤、抗心腦血管疾病、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、治療骨質(zhì)疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗輻射等作用。近年來，世界上掀起了植物藥開發(fā)的熱潮，植物藥以其天然低毒的特點倍受青睞，而黃酮類化合物以其廣譜的藥理作用引人矚目，大蒜分布廣泛，本文實驗結(jié)果表明，大蒜中含有較為豐富的黃酮。因此，大蒜具有廣泛開發(fā)和利用價值，值得綜合利用加強資源開發(fā)。(時珍國醫(yī)國藥第17卷第12期 黃鎖義 劉嬌 羅建華)

　　產(chǎn)品型號：JP600G型超聲波提取/乳化機組

　　機型結(jié)構(gòu)：超聲波發(fā)生器與提取罐分體式

　　超聲頻率：28KHz

　　超聲峰值功率：1000W (由原600W升級至1000W，價格不變)

　　提取罐內(nèi)尺寸：直徑320 ×高250mm

　　提取罐容積：小于等于20L

　　攪拌電機功率：15W

　　攪拌電機轉(zhuǎn)速：10-30轉(zhuǎn)/min(可調(diào))

　　電加熱功率：2KW

　　供電電源：220VAC 50HZ

　　具有數(shù)顯時鐘可調(diào)功能

　　具有數(shù)顯功率可調(diào)功能

　　具有數(shù)顯掃頻可調(diào)功能

　　具有數(shù)顯溫度可調(diào)功能

　　武漢嘉鵬電子有限公司專業(yè)致力于超聲波提取/萃取、超聲波乳化、超聲波清洗、超聲波污水處理、超聲波酒類醇化產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)及銷售。公司擁有多項技術(shù)。其中“數(shù)字式大功率多用途超聲波電源系統(tǒng)”獲武漢市重大科技成果獎。數(shù)字掃頻實現(xiàn)了用戶迫切需要的變頻要求的同時還彌補了早期雙頻或多頻技術(shù)帶來的超聲轉(zhuǎn)換效率很低的弊端。此項技術(shù)經(jīng)由全國各大院校的用戶使用后反應很好。應用于植物提取、乳化、污水處理等領(lǐng)域，院校包括：清華大學、北京大學、浙江大學、華中科技大學、武漢大學、華中師大、中國地質(zhì)大學、武漢科技大學、上海交大、浙江工業(yè)大學、蘭州大學、河南農(nóng)業(yè)大學、武漢化工學院、吉林大學、四川大學、華南理工大學、華東理工大學、江漢大學、長江大學、中科院武漢植物所、昆明植物所、中科院過程所、中科院武漢物理所、武漢市藥檢所等。公司產(chǎn)品行銷全國除港、澳、臺外的所有省份及直轄市。售后方面：公司產(chǎn)品使用自主技術(shù)故性能穩(wěn)定、質(zhì)量很好。公司承諾5年內(nèi)免費質(zhì)保。用戶采用超聲波需注意的事項：超聲波提取方面：一、被提取物需粉碎到20目或更細。粉碎越細得率越高。二、選用合適的提取溶劑。三、根據(jù)產(chǎn)品的特性和產(chǎn)量合理的安排提取工藝。

　　超聲波乳化方面：一、乳化液的配方包括乳化劑的用量。二、乳化時間的選定，并不是時間長就越好，乳化過程是分散和聚合不停的循環(huán)的過程。按現(xiàn)有試驗結(jié)果顯示10-15分鐘的乳化粒徑可達100納米。

　　重要的是數(shù)字掃頻的選擇，此項共有16檔選擇，數(shù)值越低則氣泡越粗、力量越大;數(shù)值越高則氣泡越細、力量越小。不同的提取或乳化物質(zhì)改變數(shù)字掃頻會帶來不同的效果及效率。

　　超聲波提取天然產(chǎn)物包括超聲波提取多肽、氨基酸、核酸、各種酶類、單糖、寡糖、多糖、糖蛋白、樹脂、膠體物、木質(zhì)素、維生素、脂肪、油脂、蠟、生物堿、揮發(fā)油、黃酮、糖苷類、苯丙素類、有機酸、酚類、醌類、甾體化合物、抗生素類等。